AMPK/mTOR通路对慢性支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响及机制

摘要：

目的:观察二甲双胍对慢性支气管哮喘(哮喘)动物模型的气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的影响及机制。方法:使用OVA致敏法制备慢性哮喘模型，末次激发48 h后处死大鼠，使用酶消化法进行ASMCs的原代分离培养。对原代培养的ASMCs的一磷酸腺苷活化的蛋白激酶α1(AMPK-α1)、S期激酶相关蛋白(SKP-2)的表达使用shRNA进行干扰，之后采用Western blot检测AMPK/mTOR通路相关蛋白的表达。结果:在原代培养的ASMCs中，二甲双胍可激活AMPK通路，能明显抑制ASMCs的增殖；雷帕霉素亦可明显抑制细胞的增殖，两者均存在明显的量效关系(
P值均<0.05)。沉默AMPK基因表达后，可使ASMCs增殖增加(
P<0.01)，进一步分析发现mTOR及下游的p70s6k磷酸化增加(
P<0.05)，从而上调SKP-2基因表达(
P<0.05)、下调P21基因表达(
P<0.01)；沉默SKP-2基因表达，再干扰AMPK基因的表达，可逆转其促进细胞增殖的作用(
P<0.01)。
结论:AMPK/mTOR通路对ASMCs增殖的调节是通过调节SKP2表达，进而影响P21水平实现的。二甲双胍作为AMPK的激动剂，有潜在的抑制哮喘患者气道平滑肌增生、进而改善气道重塑的作用。

关键词：哮喘、模型，动物、气道平滑肌、增殖、AMPK/mTOR通路、shRNA干扰

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资助基金：国家自然科学基金81470223;National Natural Science Foundation of China81470223

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1712-1719