低浓度纳米银促进脐带间充质干细胞成骨分化的研究

摘要：

目的 研究纳米银对人脐带间充质干细胞(hUCMSC)的毒性作用及成骨分化影响.方法 首先,从人脐带中分离出hUCMSC,通过免疫荧光双染对hUCMSC进行细胞鉴定.将纳米银及硝酸银作用于hUCMSC 24 h,用CCK-8细胞活力测试检测它们的细胞毒性,得出最大安全质量浓度.以此质量浓度的纳米银及硝酸银作用于hUCMSC,以碱性磷酸酶(ALP)活力、茜素红染色及定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测纳米银及硝酸银对hUCMSC成骨分化的影响.用罗丹明-鬼笔环肽染色检测纳米银对hUCMSC细胞骨架的作用,用蛋白免疫印迹法测试纳米银对hUCMSC RhoA蛋白水平的影响.结果 纳米银及硝酸银的细胞毒性呈剂量依赖性,在纳米银4 μg/mL及硝酸银2μg/mL时,无细胞毒性作用发生.与空白组及硝酸银组相比,在4 μg/mL纳米银作用下,hUCMSC的ALP活性更高,形成钙结节的量更多,且成骨分化相关基因(Runt相关转录因子2、骨桥蛋白、骨钙蛋白、骨形态发生蛋白-2、Ⅰ型胶原蛋白α1链)的表达更高.罗丹明-鬼笔环肽染色显示,纳米银可诱发hUCMSC的肌动蛋白聚合,增加细胞骨架张力.蛋白免疫印迹法测试显示,纳米银提高了活化RhoA蛋白水平,而硝酸银无此作用.结论 纳米银可在合适的质量浓度通过活化RhoA蛋白、诱导肌动蛋白聚合及增加细胞骨架张力提高hUCMSC的成骨分化能力,且此作用与银离子无关.

关键词：纳米银、成骨分化、干细胞、细胞毒性、RhoA蛋白

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资助基金：山东省自然科学基金ZR2017LH018B

在线出版日期：2019-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：178-186