10.3706/cma.j.issn.1673-4092.2013.04.005
单纯疱疹病毒Ⅱ型ICP27对Vero细胞凋亡作用的研究
目的 探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型转录前蛋白ICP27对Vero细胞凋亡作用及其参与细胞凋亡的可能途径.方法 用前期构建成功的pcDNA3.0-ICP27质粒瞬时转染Vero细胞,MTT法检测pcDNA3.0-ICP27转染Vero细胞的活性,Giemsa染色及流式细胞术检测转染后ICP27在细胞凋亡中的作用,实时荧光定量PCR检测Bax、Bcl-2 mRNAs的变化和对凋亡执行蛋白Caspase-3的活性的检测以探讨ICP27参与细胞凋亡的途径.结果 pcDNA3.0-ICP27转染Vero细胞后,MTT法检测发现其活性明显低于转染pcDNA3.0及空白转染的Vero细胞活性;Giemsa染色后发现转染pcDNA3.0-ICP27的Vero细胞变圆,细胞核破裂,流式细胞检测发现pcDNA3.0-ICP27转染的Vero细胞发生的凋亡率更高.凋亡执行蛋白Caspase-3的活性明显高于转染pcDNA3.0及空白对照;荧光定量PCR检测Bax、Bcl-2 mRNAs的变化,转染重组质粒的Vero细胞中Bax mRNAs表达量上调,Bcl-2 mRNAs表达降低,Bax/Bcl-2明显高于正常培养的Vero细胞及转染pcDNA3.0质粒的Vero细胞.结论 ICP27对Vero细胞有促进细胞凋亡的作用.而这种作用可能是使Bax及Bcl-2在细胞中的比例发生变化而导致的.
HSV-2、ICP27、真核表达、凋亡
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R735.7;R363;R589.5
2013-10-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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