Bcl2过表达重组腺病毒的构建及鉴定

摘要：

目的 构建人B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)过表达载体pENTER-Bcl2,检测其在人成骨肉瘤细胞中的表达及对细胞活性的影响.方法 利用qPCR扩增Bcl2全长cDNA,构建表达载体pENTER-Bcl2,经测序证实后将其转染至人成骨肉瘤细胞(MG63)中,利用qPCR和Western blot方法检测Bcl2的表达,利用MTT检测细胞活性.结果 DNA测序结果显示构建的pENTER-Bcl2载体表达与实验设计相符;Ad-Bcl2组Bcl2 mRNA表达较NC对照组和空白对照组高(P均＜0.01);Ad-Bel2组Bcl2蛋白表达较NC对照组和空白对照组高(P＜0.05,P＜0.01);与NC对照组比较,Ad-Bcl2感染细胞活性增强(P＜0.05).结论 构建的pENTER-Bcl2能在MG63细胞中过表达Bcl2;Ad-Bcl2可以提高细胞的活性,这为研究Bcl-2在骨质疏松发生时的分子生物学机制奠定了基础.

关键词：过表达人B细胞淋巴瘤-2载体、人成骨肉瘤细胞MG63、构建

所属期刊栏目：42

分类号：R-33;R73-3(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金项目81373653,81302991,81674004,81673786;广东省科技计划项目2016A020216024;广东省自然科学基金项目S2013040016828,2014A030310127

在线出版日期：2018-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：909-912