沉默C-SKI对大鼠心肌细胞H9C2细胞增殖与侵袭能力的影响研究

摘要：

目的 通过慢病毒载体沉默心肌细胞细胞系H9C2中C-SKI(c-ski)基因的表达,探讨C-SKI基因沉默后对心肌细胞细胞增殖、凋亡及迁移的调控作用.方法 应用RT-PCR及蛋白质印迹方法 检测SW620,HT-29,Lo-Vo,H9C2及RKO细胞系中C-SKI的表达状况;设计人C-SK1基因的shRNA慢病毒载体,在293T细胞中包装病毒并感染C-SKI高表达的心肌细胞细胞系,运用蛋白质免疫印迹的方法 鉴定其对C-SKI基因的沉默效果;C-SKI基因沉默后通过MTT实验检测其对细胞增殖能力的影响,并应用Transwell迁移实验检测细胞的体外侵袭迁移能力.结果 C-SKI在H9C2中高表达,构建C-SKIshRNA慢病毒载体沉默H9C2细胞中C-SKI的表达,蛋白质免疫印迹结果 提示,C-SKI稳定沉默的H9C2细胞构建成功.在稳定沉默C-SKI基因后,MTT法显示C-SKI沉默不会影响细胞的增殖能力.细胞小室实验结果 显示,C-SKI沉默后H9C2侵袭和迁移能力均增强(P＜0. 001).结论 C-SKI基因能够一定程度上抑制心肌细胞的迁移和侵袭,进而参与了心肌细胞纤维化的发生发展.

关键词：心肌细胞、C-SKI、细胞增殖、迁移

所属期刊栏目：42

分类号：R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：浦东新区卫生系统优秀青年医学人才培养计划PWRq2014-03

在线出版日期：2018-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：6-8,封3