10.3969/j.issn.1000-744X.2017.02.007
磷酸化cAMP反应元件结合蛋白对发育期人牙乳头细胞增殖和分化的影响
目的 构建CBP抑制表达慢病毒载体,探讨CBP有效表达沉默后对体外培养人牙乳头细胞(human dental papilla cells,HDPC)的增殖及分化影响.方法 利用基因重组技术构建重组慢病毒建立牙乳头细胞沉默稳转细胞,采用CCK-8检测细胞增殖的变化,采用检测分化相关蛋白的表达评价CBP对HDPC分化能力的影响.结果 测序结果提示成功构建四组人CBP基因的重组慢病毒;转染HDPC后,通过RT-PCR和蛋白质印迹法筛选获得有效靶点的重组慢病毒;CCK-8检测结果表明HDPC在CBP表达下调后增殖活性受到抑制;慢病毒介导CBP沉默后影响了HDPCs相关分化蛋白ColI、OCN、OPN的表达,较对照组显著下调(P<0.05);牙乳头细胞的ALP活性在转染重组慢病毒后5,7,14 d后显著降低(P<0.05);结论 成功构建了高效CBP抑制表达载体,CBP沉默可抑制HDPCs的增殖和分化.
牙发育、CBP、重组慢病毒、人牙乳头细胞、生物学作用
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R780.2(口腔科学)
贵阳市高层次创新型青年科技人才培养计划筑教发[2012HK]209-50号;西部地区人才培养出国特别项目[2013]5044号
2017-04-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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