人TIMP-2基因的克隆及其原核表达

摘要：

目的 构建人TIMP-2重组表达载体,并在大肠杆菌BL21 (DE3)中表达.方法 提取人肝癌细胞(Hep G2)总RNA后,经RT-PCR扩增获得目的片段,插入克隆载体pMD18-T;酶切鉴定和测序后将TIMP-2导入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒pGEX-TIMP-2.将重组质粒转化至大肠杆菌菌株BL21 (DE3)中,IPTG诱导融合蛋白表达后用SDS-PAGE电泳检测并用western blot验证(蛋白质印迹法).结果 成功构建原核重组表达载体pGEX-TIMP-2,并在原核宿主BL21中大量表达融合蛋白GST-TIMP-2.结论 克隆人TIMP-2基因并在原核生物中大量表达.

关键词：基质金属蛋白酶抑制因子2、pGEX-4T 1、原核表达、肝癌

所属期刊栏目：40

分类号：R329.2+5(人体形态学)

资助基金：贵州省科学技术基金黔科合LG字2012007;贵州省科学技术基金黔科合J字20142025

在线出版日期：2016-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：344-347