放线菌16S rDNA 片段扩增方法的优化

摘要：

目的：通过对放线菌PCR扩增方法的综合改进，找到某些用常规手段难扩增的放线菌16S rDNA的最佳PCR扩增条件。方法（1）提取放线菌基因组DNA并对其进行PCR扩增以找到最适退火温度；（2）改变PCR反应体系中模板DNA和Mg2＋的浓度；（3）在反应体系中加入适量的二甲基亚砜。结果在25μL的PCR反应体系中，模板DNA浓度为10×、加入0．5μL的Mg2＋和5％的二甲基亚枫、退火温度为59℃时对放线菌16S rDNA扩增效果最为理想。结论本实验研究出一种扩增放线菌16S rDNA的优化条件，为今后大批量的放线菌的分子生物学研究提供了更加高效、方便、快捷、经济的实验方法。

关键词：聚合酶链式反应、16S rDNA、放线菌

分类号：R379.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然基金地方项目31060006号及31260029号；贵阳市科技局社会发展与民生计划[筑科合同201110316号]；贵州省社会发展科技攻关项目[黔科合 SY 字20113017号]；贵阳市科技局科技创新平台计划筑科合同2012303号

在线出版日期：2014-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：483-486