固相金属亲和层析纯化全长人PPARγ重组蛋白

摘要：

建立全长人PPARγ重组蛋白的固相金属亲和层析纯化方法.利用E.coli BL21 (DE3)细胞外源性表达出全长人PPARγ重组蛋白,采用固相金属亲和层析法纯化目标蛋白.通过考察咪唑浓度对纯化的影响,确定在8 mol/L尿素下,用含50 mmol/L咪唑的缓冲液冲洗,200mmol/L咪唑缓冲液洗脱,可获得纯度为95％的目标蛋白,透析复性后经放射配体受体饱和结合实验测定全长人PPARγ重组蛋白的解离常数Kd为106士6nmol/L.结果表明本文所建立的方法能够成功纯化出高纯度的目标蛋白,经复性后,可获得用于结构和功能研究的全长人PPARγ重组蛋白.

关键词：固相金属亲和层析、全长入过氧化物酶体增殖物激活受体y、活性

所属期刊栏目：30

分类号：Q815;O657.7(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金资助项目30772595

在线出版日期：2013-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：882-886