荧光猝灭法研究NADH、Thio-NAD+与3α-HSD的相互作用

摘要：

采用荧光猝灭法研究了两种辅酶,还原型烟酰胺嘌呤二核苷酸(NADH)、氧化型硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Thio-NAD+)与3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)的相互作用.研究结果表明,NADH和Thio-NAD+的加入均能使3a-HSD的内源性荧光发生猝灭,其猝灭机制均属于生成复合物的静态猝灭；25℃下NADH、Thio-NAD+与3α-HSD的结合常数分别为7.38×104、1.23×104L·mo1-1; 37℃下NADH、Thio-NAD+与3α-HSD的结合常数分别为4.69×104、9.74×103L·mol-1;NADH与3a-HSD的结合作用力为氢键和范德华力,Thio-NAD+与3a-HSD的结合作用力主要为静电引力和疏水作用力;NADH和Thio-NAD+均能使3α-HSD构象发生变化,导致色氨酸残基所处环境极性增大.

关键词：荧光猝灭法、3a-羟类固醇脱氢酶、还原型烟酰胺嘌呤二核苷酸、氧化型硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸

所属期刊栏目：28

分类号：O657.32(分析化学)

资助基金：浙江省科技计划项目2008F70051

在线出版日期：2012-02-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2173-2178