基于β-catenin通路研究富血小板纤维蛋白复合β-磷酸三钙对小鼠成骨细胞成骨分化的影响

摘要：

目的:探究不同浓度富血小板纤维蛋白(Platelet-rich fibrin,PRF)对小鼠成骨细胞增殖与分化的影响,并观察最优浓度PRF复合β-磷酸三钙对小鼠成骨细胞成骨分化的影响.方法:首先实验分为6组,分别用0％、10％、20％、30％、40％、50％浓度的PRF培养MC3T3-E1成骨细胞,通过CCK-8法检测观察细胞增殖情况,ELISA检测细胞碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性,划痕实验检测细胞迁移能力,茜素红染色观察细胞钙结节形成情况.随后实验分为2组,对照组无PRF培养细胞,实验组为最佳浓度PRF培养细胞,两组成骨细胞均复合于β-磷酸三钙,在1 d、3 d和7 d采集细胞,通过ELISA检测骨钙素(OC)和Ⅰ型胶原蛋白(COL-1)的表达,通过WB检测β-catenin、LEF-1、RunX2、Osterix和OPN的蛋白表达.最后,使用β-catenin抑制剂XAV-939处理成骨细胞,通过ELISA检测细胞ALP活性,WB检测β-catenin、LEF-1、RunX2、Osterix和OPN的蛋白表达.结果:10％～50％浓度的PRF均促进了MC3T3-E1成骨细胞的增殖能力和迁移能力,并提高了成骨细胞ALP活性和钙化结节数量,50％PRF是实验中的最佳浓度.此外50％PRF提高复合β-磷酸三钙成骨细胞的OC和COL-1的表达及β-catenin、LEF-1、RunX2、Osterix和OPN的蛋白表达.抑制β-catenin可以降低成骨细胞ALP活性及降低β-catenin、LEF-1、RunX2、Osterix和OPN的蛋白表达.结论:PRF促进成骨细胞增殖分化,浓度越高,效果越明显,50％PRF是本实验中的最佳浓度,其次PRF促进成骨细胞在β-磷酸三钙支架上的骨生成,其与β-catenin通路激活有关.

关键词：富血小板纤维蛋白;β-磷酸三钙;骨生成;成骨细胞;骨分化

所属期刊栏目：42

分类号：R783.3(口腔科学)

资助基金：资阳市科技计划项目Zykjjsc20-yyjc-2020-09

在线出版日期：2022-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：5-11