5hmC及其Tet氧合酶在小鼠视网膜成熟过程中的调控

摘要：

目的:通过两个不同年龄段的小鼠视网膜组织来探究小鼠视网膜成熟过程中5hmC表达的稳定性及Tet氧合酶的调控情况.方法:选取2周龄及2月龄健康雄性野生型C57BL/6J小鼠各30只,采用免疫荧光技术分别检测2周龄和2月龄小鼠视网膜组织中5hmC表达情况以及通过qRT-PCR技术和蛋白免疫印迹技术检测Tet1,Tet2和Tet3的表达水平.进一步选取2月龄体重相近健康的雄性小鼠45只,使用视神经夹以相同的力度夹持小鼠右眼球后视神经10 s,夹伤后第7天小鼠右眼为实验组,左眼为空白对照组.探究视网膜神经节细胞损伤过程中5hmC及Tets的变化情况.结果:(1)免疫荧光技术检测显示在小鼠发育过程中2周龄和2月龄小鼠视网膜组织中5hmC均有表达,相较2周的小鼠视网膜组织,2月的小鼠视网膜组织5hmC在视网膜各层细胞(GCL,INL和ONL)均表达.此外,5hmC表达位于视网膜神经节细胞,并且与Bm3a在细胞内共定位.(2)无论是出生后2周还是2个月的小鼠视网膜组织中,Tet3蛋白含量最高,Tet2次之,Tet1最低.随后,qRT-PCR和蛋白免疫印迹结果显示随着年龄的增加,Tet1与Tet2蛋白表达呈现下降趋势,而Tet3蛋白的表达增加,差异有统计学差异(P＜0.05).(3)视神经夹伤第7天,视网膜神经节细胞中5hmC及Tet3的表达出现明显降低.结论:5hmC参与小鼠视网膜成熟过程,Tet3是小鼠视网膜成熟过程中的主要调节蛋白.此外,5hmC及Tet3是视网膜神经节细胞成熟过程中稳定的标志物,可能是视网膜神经节细胞保护的新靶点.

关键词：Tet家族蛋白、5-羟甲基胞嘧啶、视网膜神经节细胞、损伤

所属期刊栏目：39

分类号：R339.14+6(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金项目;校内自然科学启动基金项目;校级创新团队项目;心脑血管疾病防治教育部重点实验室开放课题;研究生创新专项资金项目

在线出版日期：2020-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1081-1087