氧化应激影响肝癌细胞糖异生关键基因表达的作用

摘要：

目的:研究氧化应激在肝癌细胞(HepG2细胞)中对糖异生关键基因G6PC(glucose-6-phosphatase,G-6-pase)和GLUT4(glucose transport protein4)的影响,并揭示其潜在的调控机制.方法:利用双氧水(H2O2)处理肝癌细胞导致其细胞内氧化应激水平升高,然后通过qRT-PCR检测G6PC基因和GLUT4基因在不同时间和不同浓度药物处理后的转录表达情况,再通过Western Blot技术检测G6PC和GLUT4在不同时间和不同浓度药物处理后的蛋白表达变化.最后,通过免疫荧光实验对比双氧水处理前后G6PC和GLUT4的蛋白表达情况以及转录因子FOXO1(Forkhead box O1)的蛋白定位情况,从而揭示氧化应激在肝癌细胞中调控糖异生的作用机制.结果:(1)qRT-PCR实验结果表明G6PC基因和GLUT4基因的转录表达与H2O2处理的时间和浓度均呈正相关;(2)Western Blot实验结果表明G6PC和GLUT4的蛋白表达与H2O2处理的时间和浓度均呈负相关;(3)H2O2处理后,免疫荧光结果显示G6PC和GLUT4蛋白整体荧光亮度较对照组减弱,但G6PC和GLUT4在核内的荧光亮度较对照组稍强;(4) H2O2处理后,免疫荧光结果显示转录因子FOXO1在核内的荧光亮度较对照组减弱及胞质荧光亮度较对照组增强.结论:氧化应激能够诱导转录因子FOXO1从细胞质转入细胞核,从而导致HepG2肝癌细胞糖异生基因(G6PC和GLUT4)的转录表达升高.

关键词：氧化应激、FOXO1、HepG2肝癌细胞、糖异生基因

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分类号：R730.23(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金项目81760160;心脑血管疾病防治教育部重点实验室开放课题项目XN201807;江西省教育厅科技项目GJJ170882;赣州市实验动物工程技术研究中心项目202-4070;校自然科学基金项目QD201605;校级创新团队课题TD201708;赣南医学院本科生科技创新项目XS201724

在线出版日期：2019-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：440-445