稳定表达TSLC1基因骨肉瘤MG63细胞系的建立及鉴定

摘要：

目的 建立稳定表达人肺癌抑癌基因-1(TSLC1)骨肉瘤细胞系并对其进行鉴定.方法 脂质体转染的方法 将真核表达载体pCI-TSLC1稳定转染至MG63细胞系,经克隆化培养以及G418筛选,获得了1株稳定高表达TSLC1蛋白的细胞系.对其表达的蛋白性质进行了鉴定,对其分泌动态、细胞纯度、遗传稳定性、外源基因整合等生物学特性做了鉴定.结果 获得高表达TSLC1的稳定细胞系,命名为M8T.生物学性状研究结果 表明该转基因细胞系纯度好,遗传性状稳定,抽提细胞RNA进RT-PCR,扩增到与预期结果 大小一致的DNA片段,说明TSLC1基因成功整合到细胞基因组中.细胞系无细菌和霉菌污染.结论 成功建立了稳定表达TSLC1的骨肉瘤细胞系M8T.该细胞系遗传性质稳定,为进一步研究抑癌基因TSLC1在骨肉瘤中的作用奠定了基础.

关键词：基因、肿瘤抑制、骨肉瘤、转基因、细胞系

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分类号：R73;R97

资助基金：湖北省自然科学基金资助2010CDB09302;华中科技大学自主创新研究基金资助2012

在线出版日期：2013-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：66-68,76