10.3772/j.issn.1002-0470.2010.02.017
基因枪法建立紫菜丝状体遗传转化模式
以坛紫菜和条斑紫菜的自由丝状体为材料,利用基因枪法分别转化CaMV35S、SV40、FCP、Amt、Ubi 5种启动子与报告基因组合,转化后48h进行原位组织化学染色检测,首次针对重要经济红藻紫菜的自由丝状体建立并优化遗传转化技术,为紫菜研究提供了新工具.结果显示,SV40启动子可以驱动lacZ报告基因(编码β-半乳糖苷酶)在紫菜丝状体中的瞬间表达,空白与阴性对照未检测到本底;其它4种启动子未检测到基因表达.进一步优化实验发现,在可裂膜650psi、轰击距离6cm下获得最高转化效率为8.0×10~(-5),经定量检测与双因子方差分析,是最佳转化参数,提示基因枪参数对外源基因转化效率具显著影响.
紫菜、丝状体、基因枪、lacZ报告基因、SV40启动子
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S96;S91
国家自然科学基金40506030;863计划20060110A402,2009AA10Z106;浙江省科技计划重点2004C22045
2010-04-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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