海洋芽孢杆菌碱性酯酶BSE-1的纯化与性质研究

摘要：

海洋芽孢杆菌酯酶发酵液通过低温高速离心(10000r/min,30min,4℃)、乙醇-硫酸铵双水相沉淀和Q-Sepharose HR 阴离子交换层析等技术进行了纯化,最终得到电泳纯的酯酶BSE-1.SDS-PAGE电泳结果表明,该酶表观分子量为30kDa.以对硝基苯磷酸酯(PNPP)为底物对BSE-1进行了理化性质研究,结果表明,BSE-1的最适反应温度为60℃,最适pH值为10.0,为嗜热碱性酯酶;该酶在60℃以下、pH 7～11范围内具有良好的热稳定性;与常见酸根离子、有机溶剂的配伍性较好,但金属离子对酶活影响较大,Li~+、Mg~(2+)、Ca~(2+)对BSE-1有激活作用,1mmol/L的Ca~(2+)使酶活提高2倍以上;Ba~(2+)、Fe~(3+)、Ag~+、Sr~(2+)对BSE-1有抑制作用,1mmol/L Ba~(2+)存在下酶活仅能保持10%左右.

关键词：海洋芽孢杆菌、碱性酯酶、双水相沉淀、热稳定性

所属期刊栏目：19

分类号：TQ4;R37

资助基金：863计划2007AA091602;国际科技合作重点项目2005DFA30830

在线出版日期：2010-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1316-1320