用电喷雾质谱和特异 PCR 初步鉴定粳稻 GluB 蛋白突变体

摘要：

用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法对采集于中国、日本、印尼、老挝的42份特异粳稻资源进行了分析.结果显示,在编号为B104的粳稻中有谷蛋白亚家族 GluB 基因沉默现象.将对照材料 B90 的对应蛋白进行回收染色、原位酶解,然后利用电喷雾-四极杆飞行时间质谱(ESI-Q-IOF-MS)技术进行鉴定分析.用 MASCOT 叩数据库进行比对的结果显示,该蛋白的推测分子量为 54kD,被包括 GluB2、GluB4、GluB7 等基因在内的 GluB 亚家族基因编码.为了深入探讨 CluB 蛋白的突变机制,设计了2对特异引物,以 B90 为对照,用基因组 PCR 方法来钓取并鉴定其中的 GluB4 和 GluB7 基因.鉴定结果表明 GluB7 基因在 DNA 水平上未发生变化,而 GluB4 基因发生了点突变,导致一个氨基酸的变异.研究证实,电喷雾电离质谱(ESI-MS)可以用来辅助解析植物蛋白质的复合体.

关键词：粳稻、谷蛋白、突变体、点突变、质谱分析、特异PCR

所属期刊栏目：18

分类号：TU3;TF8

资助基金：国家自然科学基金30671288、30671136;教育部新世纪优秀人才资助项目NCET-06-0810;四川省教育厅重点研究项目2005A044;四川省科技厅应用基础研究项目07JY029-002

在线出版日期：2008-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：761-765