肠炎沙门氏菌种特异性FQ-PCR快速检测方法的建立

摘要：

根据肠炎沙门氏茵(SE)种特异性DNA序列,设计合成了一对能特异性扩增130bp片段的引物和TaqMan探针,首次建立了SE的种特异性荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)诊断方法.该法在SE DNA含量为9×10 8～9×10 4拷贝有较好的线性关系;检测SE DNA模板的灵敏度为4拷贝/μL,检测SE细菌数的灵敏度为6 CFU/mL;特异性试验表明只对SE基因组呈阳性反应.分别应用该技术和传统细菌分离法检测60份来自人工感染鸭、小白鼠和肉兔的心、肝、脑和直肠粪便,结果显示两种方法对心、肝、直肠粪便的阳性检测结果符合率为100%,而FQ-PCR对脑的阳性检测率极显著(P＜0.01)高于细菌分离.研究结果表明,该方法快速、灵敏、特异、重复性好且能实时定量检测,可用于SE分离鉴定、SE感染疑似病例检测、SE体内动态分布规律研究及其分子流行病学调查.

关键词：肠炎沙门氏菌(SE)、荧光定量聚合酶链武反应(FQ-PCR)、种特异性

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分类号：S85;R73

资助基金：国家"十一五"科技支撑计划2007206-017;教育部"新世纪优秀人才支持计划"NCET-04-0906/NCET-04-0818;四川省基础研究重大项目04JY029-006-1/2006J13-049;四川省重点建设学科SZD04018

在线出版日期：2008-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：537-542