利用宏基因组文库筛选草甘膦不敏感的5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS)基因

摘要：

为探索利用宏基因组文库筛选草甘膦不敏感的5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS)基因,直接从土壤中提取细菌DNA,构建草甘膦污染土壤细菌宏基因组文库,并利用EPSP合酶缺失突变株ER2799筛选到4个能互补EPSP合酶功能的克隆,其中两个克隆的转化子能够在含5mmol/L草甘膦的MOPS培养基上生长.测序结果表明它们均含有完整的EPSP合酶编码基因,GT-1aroA核苷酸长度为1335bp,编码445个氨基酸,GT-4aroA核苷酸长度为1350bp,编码450个氨基酸.利用PCR方法将两个基因克隆到原核表达载体pET28a上后,可以使宿主细胞BL21(DE3)在含100mmol/L草甘膦的MOPS培养基中良好生长.上述结果表明,利用宏基因组文库筛选方法可以得到高抗草甘膦的EPSPS基因.

关键词：宏基因组、5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS)、草甘膦

所属期刊栏目：16

分类号：O6(化学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2004AA214170

在线出版日期：2007-01-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1284-1288