实时荧光定量RT-PCR检测石斑鱼病毒性神经坏死病

摘要：

用TaqMan探针技术设计探针和引物,建立了检测石斑鱼神经坏死病毒(NNV)的实时荧光定量RT-PCR方法.对影响PCR反应的主要因素Mg2+浓度和退火温度进行了优化,表明当Mg2+浓度为3.0～3.5 mM,退火温度为58～59℃时可获得最佳的扩增和检测效果.应用鞍带石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)NNV主衣壳蛋白基因组片段构建的噬菌体假病毒作为阳性质控品,具有很好的稳定性.鞍带石斑鱼NNV的检测试验表明,所建立的实时荧光定量RT-PCR方法是检测石斑鱼神经坏死病毒的一种快速、灵敏、准确的检测方法.

关键词：神经坏死病毒、TaqMan探针、实时荧光定量RT-PCR、石斑鱼

所属期刊栏目：16

分类号：Q95(动物学)

资助基金：国家科技攻关项目2003AA603011;福建省科技厅科研项目2002N009

在线出版日期：2006-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：431-434