利用DNA重组技术构建产生多聚甘露糖醛酸的突变菌株

摘要：

本文旨在以海洋细菌Pseudomonas sp.QDA褐藻多糖(alginate)生物合成操纵元中的algG基因为靶点,利用DNA重组技术改建褐藻多糖的生物合成途径,以期获得产生甘露糖醛酸的突变菌株.首先,利用PCR克隆algG基因两侧大小分别为1.7kb和1.8kb的DNA片段作为同源片段,用编码Gm抗性的aacC1基因替换algG基因,构建成打靶载体pEX100TUDG.将打靶载体转入QDA,利用Gm抗生素和蔗糖为选择压力进行培养,通过PCR和Southern杂交验证,获得了突变菌株.1H-NMR、PAGE和GPC分析发现,突变菌株胞外产物为多聚甘露糖醛酸.该突变菌株的获得丰富了具有较高药物开发价值的甘露糖醛酸的来源,为褐藻多糖途径工程的进一步研究提供了理论依据和技术支持.

关键词：多聚甘露糖醛酸、途径工程、假单胞菌、差向异构酶

所属期刊栏目：16

分类号：Q81(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金30371683

在线出版日期：2006-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：175-180