栉孔扇贝C型凝集素基因的克隆与表达研究

摘要：

C型凝集素作为凝集素家族中的主要成员之一,在识别外来微生物表面碳水化合物基团和激活体液中免疫因子等方面具有重要作用.本研究在EST分析的基础上采用锚定PCR方法克隆得到了该基因的全长cDNA.克隆得到的栉孔扇贝C型凝集素 cDNA全长1038bp,编码区684bp,可以编码228个氨基酸.在该编码的氨基酸序列中发现了C型凝集素家族的特征模体和一个C型凝集素的结构域(C-type lectin domain, CTLD).通过Clustalw 和SMART分析在该序列中发现了形成二硫键的4个保守的半胱氨酸,与其他物种C型凝集素的二硫键结构非常相似.结合BLAST分析的结果,可以确认所获得的cDNA序列是栉孔扇贝C型凝集素的编码序列.用RT-PCR技术在鳗弧菌感染前后的血细胞中均可以检测到该基因的表达,但病原刺激前的表达水平相对较低,病原刺激后4h起表达开始升高,并在6h达到最高,随后逐渐开始下降,并于32h恢复到原来水平,该结果表明C型凝集素存在组成型和诱导型两种调控机制,在扇贝防御病原感染的过程中发挥重要作用.

关键词：栉孔扇贝、EST、cDNA文库、C型凝集素、RT-PCR、mRNA表达

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分类号：S51;S66

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2002AA626020;国家重点基础研究发展计划973计划G1999012008;国家自然科学基金40276045

在线出版日期：2005-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：83-88