抗稻瘟病新基因pi-hit-1的克隆与功能研究

摘要：

采用差异显示法(DD-PCR)寻找易感稻瘟病的突变品系与野生型对照品系中的差异表达基因.结果发现与野生型对照相比,Rubisco小亚基、pi-hit-1(AF450251)和pi-hit-2(AF448491)基因在易感稻瘟病的突变品系中高表达,pi-hit-1和pi-hit-2是功能未知的新基因.进一步采用电子克隆和RT-PCR方法克隆了pi-hit-1基因的全长cDNA(AF514859),该基因编码的蛋白质属于ATP依赖的Clp蛋白酶家族.分析pi-hit-1基因的组织特异性表达发现,此基因在叶片组织特异表达.进一步设计接种诱导实验研究pi-hit-1基因表达与水稻稻瘟病易感性的关系.在易感稻瘟病的突变品系中pi-hit-1受稻瘟病菌诱导,接种后其表达量明显升高,而野生型对照品系pi-hit-1基因表达在接种前后无明显变化.比较易感稻瘟病的突变品系与对照品系pi-hit-1基因序列差异发现,稻瘟病敏感品系中pi-hit-1基因第一外显子发生缺失突变使pi-hit-1蛋白功能缺失,导致突变品系易感稻瘟病.这些实验结果提示野生型pi-hit-1是稻瘟病抗性基因.

关键词：稻瘟病抗性、pi-hit-1、Clp蛋白酶、差异显示

所属期刊栏目：14

分类号：S33;S51

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划;哈尔滨工业大学校科研和教改项目

在线出版日期：2004-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：21-26