离子强度对于牛精蛋白在大肠杆菌中的表达的影响

摘要：

通过基因合成将大肠杆菌偏好的精氨酸密码子CGT取代野生型牛精蛋白基因中的稀有精氨酸密码子AGA和AGG,得到密码子优化的牛精蛋白基因,并将其克隆入原核表达载体pGEX-2T中,组装成表达载体pGEX-2T-PS.将这个表达载体转化入大肠杆菌表达菌株BL21中,经IPTG诱导,可得到一33kD融合蛋白表达带,首次成功地将牛精蛋白在大肠杆菌中进行了表达,但其表达量很低,约为总菌体蛋白的13%.增加表达菌株培养液的离子强度,可将蛋白表达含量提高到28%,且蛋白表达量与离子强度呈正相关.纯化后的牛精蛋白可在体外条件下与DNA发生结合.

关键词：离子强度、牛精蛋白、大肠杆菌、表达

所属期刊栏目：13

分类号：Q95(动物学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA213021

在线出版日期：2003-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：39-44