卤虫体外转录模型及其转录活性检测

摘要：

通过改进的细胞核提取方法,获取了纯度较高的细胞核并建立了卤虫体外转录系统模型.将待检测基因与含转录起始位点的报告基因的编码序列相连,制备成体外转录模板.由于体外转录所产生的RNA量极少,需要一种灵敏的方法检测生成的RNA.应用了RT-PCR技术鉴定体外转录产物的方法能有效解决这一问题.转录后,用无RNase的DNaseI将DNA模板完全降解;生成的RNA经逆转录反应合成cDNA,再以cDNA为模板,用相应的引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测结果.该法灵敏度高,操作简单安全,无需同位素.

关键词：卤虫、体外转录、RT-PCR、基因转录调控

所属期刊栏目：11

分类号：S94;Q5(水产保护学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划863-819-04-01

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：5-8