小冰麦异附加系TAI-27中附加染色体上 NBS同源序列的扩增

摘要：

植物对病虫害的抗性主要是由抗病基因(resistance gene,R)决定的。目 前已经克隆 了20多个R基因，大部分都属于NBS-LRR类，这类基因编码NBS(nucleotide binding site, NBS)和LRR（leucine-rich repeat, LRR）两个比较保守的结构域。植物的NBS有几个保守 区 ，本文根据其中的P-loop和GLPL两个保守区设计了简并引物，通过PCR扩增NBS序列。在PCR 扩增中使用的DNA模板是从小冰麦异附加系TAI-27中微分离的附加的单条染色体，这条 染色体上携带BYDV(barley yellow dwarf virus, BYDV)抗性基因。PCR扩增产物主要有三 条带，200bp, 400bp和950bp，将其中的200bp(nbsA)和400bp(nbsB)克隆到pGEM T-vec tor上并分别测序。3个nbsA克隆的测序结果完全一致；对nbsB的60多个克隆的不同酶切分析 ，只发现了一个克隆的酶切特性与其他不同。所以说，以单条染色体为模板PCR扩增产物组 成比较简单，省去了RFLP作图的许多工作，可以为克隆R基因提供特异性探针。本文的实验 设计将染色体微切割和微克隆技术与基因克隆联系在一起，为克隆R基因提供了一条捷径。

关键词：抗病基因、小冰麦异附加系TAI-27、NBS、PCR

所属期刊栏目：11

分类号：Q3(遗传学)

资助基金：中国科学院青年基金

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：21-26