GPC3过表达载体的构建和表达检测

摘要：

目的 构建并检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)真核表达重组质粒.方法 提取肾组织RNA进行逆转录,扩增GPC3基因的编码区,将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,酶切鉴定并测序；将克隆成功的质粒转染至Huh7细胞,用荧光定量PCR和Western blot检测GPC3的表达水平.结果 成功扩增GPC3编码区,并克隆至载体pcDNA3.1中；GPC3过表达载体转染至Huh7细胞后,荧光定量PCR和Western Blotting检测结果显示GPC3mRNA和蛋白表达水平均明显增加.结论 成功构建GPC3过表达载体可用于后续研究.

关键词：glypican-3、质粒、肝细胞癌

所属期刊栏目：30

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：广东省科技计划项目20101700501;广东省医学科研基金B2011242

在线出版日期：2013-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：355-357