靶基因Bi-1RNAi重组慢病毒载体的构建与鉴定

摘要：

目的 构建靶向人Bax Inhibitor-1(Bi-1)基因的shRNA慢病毒重组载体.方法 借助siRNA设计工具,并结合文献资料选取Bi-1基因编码序列中有效的干扰靶点,根据连接载体中的酶切位点自行设计并人工合成干扰靶点的一对反义脱氧寡核苷酸链,先定向克隆到pU6载体(pU6-Bi-1-shRNA),再经双酶切后克隆到慢病毒包装质粒LunIG,得到靶向Bi-1基因沉默的慢病毒包装重组质粒LunIG-Bi-1.重组质粒经PCR法进行初筛后,再通过双酶切电泳和目的 基因沉默效果的检测保证插入序列的正确性.结果 靶向沉默Bi-1基因的shRNA序列成功插入到慢病毒包装质粒LunIG中.结论 靶向Bi-1基因沉默的慢病毒shRNA包装重组质粒构建成功.

关键词：Bi-1、基因沉默、RNAi、慢病毒载体

所属期刊栏目：28

分类号：R739.63(肿瘤学)

资助基金：广东省科技计划项目83039;湛江市科技攻关项目2009C3101012

在线出版日期：2011-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：489-492