人pot1基因cDNA的克隆及其在HeLa细胞中的表达

摘要：

目的:克隆人端粒保护蛋白 (human protection of telomeres 1,pot1)基因cDNA全编码区,构建成真核表达质粒并实现在HeLa细胞中的表达.方法:RT-PCR法扩增出HeLa细胞hpot1基因cDNA编码区全序列,定向克隆至真核表达载体pcDNA3,阳性重组质粒经插入片段测序验证;重组的pcDNA3-hpot1质粒瞬时转染HeLa细胞,RT-PCR和EMSA法(电泳迁移率改变分析)检测hpot1基因的表达水平.结果:来自Hela细胞的hpot1基因cDNA编码区全序列构建成的真核表达质粒pcDNA3-hpot1,经测序分析序列和ORF正确;该重组质粒转染在HeLa细胞48h后,hpot1基因表达水平增高.结论:真核表达载体pcDNA3-hpot1构建成功,并实现了hpot1在Hela细胞中的表达.

关键词：hpot1基因、克隆、真核表达

所属期刊栏目：23

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：广东省博士启动基金04011397

在线出版日期：2006-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：639-641