白细胞介素－4通过上调蛋白质精氨酸甲基转移酶1的表达水平引起对氧磷酶2的精氨酸甲基化修饰
目的 验证质谱筛选的结果 ,确定对氧磷酶2 (PON2)是否为蛋白质精氨酸甲基转移酶 1 (PRMT1 )的底物蛋白.方法 用白细胞介素－4(IL－4)刺激A549细胞后,用免疫沉淀法捕获发生精氨酸非对称性二甲基化修饰的蛋白,用梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳分析捕获的蛋白,通过银染显示差异性条带,质谱分析差异性条带中的蛋白种类.用免疫沉淀检验PON2 的甲基化修饰状态.检测PON2 和PRMT1 对IL－4表达的浓度依赖性和时间依赖性.用免疫共沉淀检测PON2 和PRMT1 的相互作用,并在MS203 抑制Ⅰ型PRMT后检测PON2的甲基化修饰水平的变化.诱导小鼠哮喘模型,检测PON2表达的组织细胞类型,以及肺组织中PON2和PRMT1 的表达水平.结果 (1 )质谱分析显示在IL－4处理的A549细胞中检出31 1 个差异显示的蛋白,PON2为其中之一.(2)免疫沉淀显示,IL－4可促进A549细胞中PON2发生精氨酸非对称性二甲基化修饰,但IL－4刺激对PON2的表达水平无影响.(3)PON2与PRMT1 有相互作用,IL－4可促进PON2与PRMT1 结合,抑制Ⅰ型PRMT活性可以削弱IL－4对PON2发生精氨酸非对称性二甲基化修饰的促进作用.(4)PON2主要在小鼠气道上皮表达,且PON2的表达水平在对照组与哮喘组组织间差异无统计学意义(P＞0. 05).结论 PON2为PRMT1 的底物蛋白.IL－4可以促进PON2发生精氨酸非对称性二甲基化修饰.
肺上皮细胞、IL-4、蛋白质精氨酸甲基转移酶1、对氧磷酶2、甲基化修饰
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R34;R562.2(人体生物化学、分子生物学)
陕西省自然科学基础研究计划项目;东莞市社会科技发展项目
2022-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
434-440
