10.3969/j.issn.1001-9448.2018.15.006
人脐血间充质干细胞向甲状腺细胞的诱导分化
目的 探索人脐血间充质干细胞(UBMSCs)诱导分化为甲状腺细胞的可能性.方法 采用羟乙基淀粉沉淀法和差速贴壁培养分离、纯化人UBMSCs,添加促甲状腺素(TSH)、胰岛素(insulin)、碘化钾(KI)等诱导因子体外共培养21 d,RT-PCR定量测定相关基因TSHR、PAX8、NIS、TPO、TG的表达;双色免疫荧光检测分化标记物PAX8和TTF-1、PAX8和TTF-2的共表达.结果 分离、纯化的细胞不表达造血细胞相关的表面抗原如CD14(0.59%)、CD34(0.04%)、CD45(0.20%)等,不表达上皮细胞相关的表面抗原如CD106(0.68%)等,强表达与间充质干细胞相关的抗原如CD13(98.95%)、CD29(92.77%)、CD44(92.67%)等.原代UBMSCs多数呈梭形,平行排列,局部形成漩涡状排列,混有少量圆形细胞;第3代UBMSCs形态比较均一,呈长梭形,折光性好.诱导后UBMSCs边界清晰,部分呈类圆形或多角形贴壁生长,折光性好.诱导前人UBMSCs、诱导后细胞(包括向成骨细胞诱导和向甲状腺细胞诱导)均可见PAX8、NIS、TSHR、TPO、TG基因的表达,其中向甲状腺细胞诱导的目的细胞表达水平最高,诱导前人UBMSCs次之,向成骨细胞诱导的目的细胞表达水平最低.视野内可见诱导后细胞中有零星散在的PAX8和TTF-1、PAX8和TTF-2共表达细胞,DAPI染色核定位示PAX8和TTF-1、PAX8和TTF-2共表达于细胞核,作为对照的诱导前人UBMSCs中未见PAX8和TTF-1、PAX8和TTF-2共表达细胞.结论 人UBMSCs在特定条件下可定向分化为甲状腺细胞.
脐血、间充质干细胞、甲状腺细胞、分化、甲状腺功能减退症
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广东省自筹经费类科技计划项目YK201511002
2018-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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