SHP -1基因在曲妥珠单抗致心肌细胞凋亡中的调控作用
目的:初步观察转染 SHP -1基因前后大鼠心肌 H9C2细胞对抗曲妥珠单抗的能力,SHP -1蛋白表达情况及转染 SHP -1基因对 H9C2细胞增殖能力的影响。方法构建真核表达载体 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1和 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1C/ S,利用脂质体转染法转染大鼠心肌 H9C2细胞,经 G418筛选阳性克隆,阳性克隆细胞在曲妥株单抗中维持生长。用 Western blot 检测 SHP -1基因在大鼠心肌 H9C2细胞中的稳定表达情况,并通过流式细胞学观察细胞凋亡曲线。结果蛋白水平证实,转染细胞内有 SHP -1基因的表达,并且转染 pcDNA3.1(﹢)- SHP -1的心肌细胞 SHP -1表达明显升高,经曲妥珠单抗干预后蛋白表达量下降。转染 pcDNA3.1(﹢)-SHP -1后 H9C6细胞在曲妥珠单抗中凋亡率明显升高(P <0.05)。结论向大鼠心肌 H9C2细胞内转染 SHP -1基因并使其稳定表达,可以促进大鼠心肌 H9C2细胞的在曲妥珠单抗中的凋亡,为以后进一步探讨 SHP -1基因的功能打下了基础。
SHP-1基因、酪氨酸磷酸酶、曲妥珠单抗、H9C2细胞
R73;J0-
国家自然科学基金资助项目编号81272546;广东省中医药局建设中医药强省科研立项课题编号20131072
2015-07-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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