10.3969/j.issn.1001-9448.2014.18.004
siRNA 对人脐静脉内皮细胞中人剪切修复基因表达和凋亡的影响
目的:向人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中导入靶向人剪切修复基因D干扰序列(XPD-siRNA),观察其对HUVEC的XPD基因表达和凋亡的影响。方法以XPD为靶基因,构建3个特异性siRNA重组质粒,经转染后观察其对HUVEC中XPD的沉默作用;并转染沉默效率最佳的siRNA,观察其对细胞凋亡的影响。结果Western blot和RT-PCR结果显示,与阴性对照组相比,3个重组质粒XPD-siRNA的转染均能降低HUVEC中XPD的表达(P<0.01),其中XPD-siRNA-2的沉默效率最高(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,与阴性对照组相比,XPD-siRNA-2组能降低HUVEC凋亡率(P<0.01)。 Western blot结果显示,与阴性对照组相比,转染XPD-siRNA-2能下调Bax(P<0.01)和上调Bcl-2(P<0.01)的表达。结论 XPD-siRNA转染能有效沉默HUVEC中XPD基因的表达。所筛选沉默效率最佳的XPD-siRNA能抑制HUVEC凋亡,而Bax和Bcl-2可能参与了此过程。
干扰序列、人剪切修复基因XPD、人脐静脉内皮细胞、转染
R73;R9
国家自然科学基金资助项目编号81060013;江西省青年科学基金资助项目编号20132BAB215015;江西省研究生创新专项资金项目编号YC2012-S024
2014-11-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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