人脐静脉内皮细胞的原代培养及鉴定

摘要：

目的 建立一种能大量分离人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)体外培养模型,并对其进行鉴定,为体外血管内皮细胞及相关疾病的研究搭建桥梁.方法 采用0.1%Ⅰ型胶原酶分离脐静脉内皮细胞,于M199培养基(含20%胎牛血清,80%M199不完全培养基,1%终浓度为50 μg/mL内皮细胞生长复合物,1%终浓度为100 μg/mL肝素钠,1%青-链霉素,1%L-谷氨酰胺)中培养,待细胞80%以上融合后,用0.25%的胰酶和0.25%的EDTA消化传代,并在倒置显微镜下观察细胞形态,用免疫荧光法对细胞进行鉴定.结果 原代培养的HUVECs在24 h后完全贴壁,2～3 d可达80%的融合,倒置显微镜下观察细胞呈鹅卵石状排布,免疫荧光显示细胞胞浆中Ⅷ因子相关抗原阳性.结论 0.1%Ⅰ型胶原酶消化HUVECs方法 便于操作,细胞获得量多且生长状态良好.

关键词：人脐静脉内皮细胞、细胞原代培养、Ⅷ因子相关抗原

所属期刊栏目：33

分类号：R97;R91

资助基金：广东省自然科学基金资助项目S2011010002074;广东省清远市科技计划立项项目2011B011112044

在线出版日期：2012-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：744-746