肠道病毒71型VP1基因的表达纯化及初步应用

摘要：

目的 表达纯化肠道病毒71型(EV71)VP1蛋白,初步建立人血清中抗EV71 IgG间接ELISA检测方法.方法 通过化学法合成肠道病毒71型VP1全基因序列,构建重组质粒pET-43.1a(+)/VP1,转化大肠杆菌BL21(DE)3,IPTG诱导表达,镍金属亲和层析纯化目的蛋白,产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定.以目的蛋白作为包被抗原,初步建立间接ELISA检测方法,并对77份6～10岁无手足口病症状儿童血清及手足口病现症患儿血清进行检测.结果 成功构建重组质粒pET-43.1a(+)/VP1,VP1融合蛋白分子量约为43 kD,纯度可达95%;初步建立了人血清中抗EV71 IgG间接ELISA 检测方法,36例HFMD现症患儿中EV71 IgG阳性22例(61.11%);41例无手足口症状儿童血清中 EV71 IgG阳性21 例(51.22%).结论 表达产物具有较好的免疫原性,可用于肠道病毒71抗体检测.

关键词：肠道病毒71、VP1、表达、纯化、间接ELISA

所属期刊栏目：32

分类号：R37;R18

资助基金：河南省科技发展计划项目102102310093

在线出版日期：2011-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1849-1851