FLAG Pull-down技术筛选LASP-1相互作用蛋白

摘要：

目的 筛选与LASP-1蛋白发生相互作用的蛋白质.方法 构建携带FLAG标签的LASP-1融合表达载体,转染人结直肠癌细胞系SW480表达FLAG-LASP-1融合蛋白,用FLAG-M2亲和柱筛选并经SDS-PAGE分析差异条带,切取差异条带酶解进行质谱鉴定.结果 成功构建pcDNA3-FLAG-LASP-1真核表达载体,转染SW480细胞表达FLAG-LASP-1融合蛋白,SDS-PAGE电泳分离得到8个差异蛋白条带,质谱鉴定LASP-1相互作用蛋白78 kDa葡萄糖调控蛋白(GRP78)和热休克同源蛋白71(HSC71).结论 GRP78、HSC71均可能与LASP-1存在相互作用,这将为进一步研究LASP-1的功能和作用机制提供依据.

关键词：LASP-1、FLAG Pull-down、相互作用蛋白、蛋白质组学

所属期刊栏目：31

分类号：R73;R74

资助基金：国家自然科学基金资助项目30901792;南方医科大学基础医学院院长基金资助项目JC0802

在线出版日期：2010-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2237-2240