10.3969/j.issn.1001-9448.2010.08.004
间日疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其鉴定
目的 研制间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)单克隆抗体,并对抗体特性进行了初步鉴定.方法 用纯化的重组PvLDH蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,测定其免疫球蛋白亚类及效价,结合ELISA、Western blot 试验分析其特异性.结果 共获得5株稳定分泌抗PvLDH重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别为6D1、6D2、5A10、5C7、4A8.5株单抗培养上清的ELISA效价为1: 512~1: 1 024,腹水效价为1: 12 800~1: 25 600,其中5C7、6D1经Western-blot鉴定能与天然的恶性疟原虫和间日疟原虫的LDH发生特异性反应.结论 本研究方法成功制备并获得了针对PvLDH的单克隆抗体,为进一步研究疟疾诊断试剂奠定了基础.
间日疟原虫、乳酸脱氢酶、单克隆抗体
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R53;R3
国家科技重大专项项目2008ZX10004-007;广州市科技计划项目2002Z3-E4012;广东省医学科研基金资助项目A2006365
2010-05-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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