抗人B型钠尿肽噬菌体抗体库的构建及噬菌体抗体的筛选

摘要：

目的 利用噬菌体表面展示技术构建抗人B型钠尿肽(BNP)的单链噬菌体抗体库及筛选抗人BNP的特异性单链噬菌体抗体.方法 从正常人外周血淋巴细胞提取总RNA,扩增抗体重链和轻链可变区基因片段,加入连接子并构建单链噬菌体抗体库.用人BNP包被的免疫管筛选噬菌体.经过4轮的富集筛选,从最后一轮噬菌体感染的大肠杆菌TG1中随机挑选20个单菌落,用ELISA方法测定阳性噬菌体抗体,并将这些噬菌体抗体与BSA进行交叉反应试验.结果 ELISA测试表明,20个单菌落中有8株吸光度较高而且交叉反应较弱的阳性噬菌体抗体,DNA测序符合预期目标.结论 成功构建人B型钠尿肽噬菌体抗体库,并筛选出表达人源性BNP单克隆抗体噬菌体,为下一步抗BNP单链抗体的表达纯化及临床应用打下了基础.

关键词：B型钠尿肽、噬菌体展示、抗体库、单链抗体

所属期刊栏目：27

分类号：R3(基础医学)

资助基金：广东省科技厅科技计划2003C31206;广东省广州市教委科研项目1035

在线出版日期：2007-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1783-1785