10.3969/j.issn.1001-9448.2003.06.012
B7-1和新型隐球菌DHA1基因嵌合重组质粒的构建
目的构建包含新型隐球菌细胞免疫主要相关基因--迟发超敏反应抗原基因(delayed-type hypersentivity antigen 1,DHA1)与小鼠共刺激分子B7-1的嵌合重组质粒.方法设计合成两对寡核苷酸引物,用PCR法分别从pUCmB7-1TM和新型隐球菌重组质粒pcDNA3-DHA1中特异扩增出编码B7-1和DHA1的基因片段(921 bp和984 bp),分别用HindⅢ,EcoRⅠ,XbaⅠ酶切后,逐个定向连接到质粒pcDNA3中,转化宿主菌DH-5α,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒.结果酶切鉴定示所切下的片段大小均与预计相符,测序结果与文献报道序列及预计结果一致,证实符合表达框架.结论该研究成功构建了新型隐球菌嵌合重组质粒pcDNA3-B7-1-DHA1,为进一步研究新型隐球菌DNA免疫奠定了基础.
共刺激分子B7-1、新型隐球菌、质粒
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R3(基础医学)
广东省科研项目970037
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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585-587