人p58.2重组逆转录病毒载体的构建及稳定包装细胞系的鉴定

摘要：

目的构建并鉴定携带人p58.2基因的重组逆转录病毒载体及稳定的包装细胞系.方法用PCR技术从pSPORT1-p58.2扩增出编码p58.2N端1～345个氨基酸的全长基因,定向克隆入逆转录病毒载体pMSCVneo中,酶切鉴定;脂质体法将重组逆转录病毒转入包装细胞系PT67,G418筛选建立稳定产病毒的细胞株.结果双酶切鉴定,成功构建重组逆转录病毒载体;重组逆录病毒载体转入包装细胞,经G418筛选,形成了抗性克隆,并测得病毒滴度为3×105 cfu/ml,提示构建携带人p58.2基因的逆转录病毒载体及稳定的包装细胞系成功.结论构建人p58.2基因的逆转录病毒载体可行,并且可望成为一种很好的对血液系统疾病进行基因治疗的方法.

关键词：p58.2基因、逆转录病毒载体、聚合酶链式反应

所属期刊栏目：24

分类号：R45(治疗学)

资助基金：国家自然科学基金39870330;广东省自然科学基金001043

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：239-241