人气道上皮细胞内皮素转换酶-1反义RNA构建

摘要：

目的研究内皮素转换酶-1（ECE-1）反义RNA对人气道上皮细胞ECE-1表达的抑制作用。方法构建ECE-1反义RNA表达载体，用脂质体(FuGENG 6)转染人气道上皮细胞株（16HBE），G418筛选得到稳定表达反义ECE-1 RNA的细胞株（anti-16HBE）。RT-PCR检测转染细胞ECE-1 mRNA的表达，Western bloting检测细胞ECE蛋白表达情况。结果①经酶切及DNA测序鉴定证明，0.7kb的ECE-1 DNA片段反向连接到带有萤光蛋白基因为报告基因的pEGPC1表达载体；荧光倒置显微镜显示大量细胞分泌荧光蛋白并能反复传代稳定表达；② anti-16HBE细胞ECE mRNA基因表达(ECE/actin β 0.012 5±0.058)比16HBE细胞(ECE/actin β 0.134 7±0.067)明显低(P＜0.05)；而Wester bloting亦显示anti-16HBE细胞ECE表达量比16HBE细胞明显低。结论ECE反义RNA表达载体可抑制人气道上皮细胞ECE-1表达与分泌。

关键词：内皮素转换酶核糖核酸反义载体构建

所属期刊栏目：22

分类号：R56(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：广东省自然科学基金980456

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：101-103