辣椒胎座cDNA酵母文库构建和鉴定

摘要：

辣椒素类物质是辣椒属植物特有的一种次生代谢产物,特异地在辣椒果实胎座中合成,且具有明显的发育阶段特异性.辣椒素合成途径相关基因主要在辣椒花后16d胎座发育至绿熟期转录,然而转录调控的精细分子机制尚不太清楚.用已知参与调控辣椒素生物合成的转录因子为诱饵,采用酵母双杂交技术从辣椒素合成阶段酵母cDNA文库中筛选与其互作的蛋白,有利于明确辣椒素生物合成的转录调控机制.因此,获得辣椒素合成阶段的高质量酵母cDNA文库是关键.本研究采用辣椒”59”自交系花后16 d (DPA)的RNA作为模板,之后用SMART cDNA/均一化cDNA文库技术(Switching mechanism at 5”end of the RNA transcript)与同源重组的方法将”59”自交系的胎座cDNA文库转化酵母感受态Y187.通过对收集的文库进行鉴定发现,滴度达到3.63×107 CFU/mL,插入片段大约250～2 000bp,文库满足酵母双杂交要求.辣椒胎座高质量cDNA文库的构建为后续辣椒素生物合成的转录调控网络研究提供了基础.

关键词：辣椒素类物质、辣椒、酵母、胎座cDNA文库

所属期刊栏目：18

资助基金：本研究由国家自然科学基金项目C150203

在线出版日期：2020-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：4317-4323