芒果多胺氧化酶2(MiPAO2)基因克隆表达分析与沉默和过量表达载体的构建
本研究以芒果果皮为材料探究多胺(PAs)和多胺氧化酶2(PAO2)对芒果果实抗逆性的作用机理.多胺(PAs)如腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)是无处不在的聚阳离子,在不同的细胞代谢过程具有广泛的功能.多胺氧化酶2 (polyamine oxidase 2,PAO2)是真核生物多胺分解代谢途径中的关键酶.本研究根据转录组测序得到芒果PAO2部分片段信息设计兼并引物,采取3'和5'cDNA末端快速克隆(RACE)的技术方法,分别在三个不同着色芒果品种(红色‘贵妃’品种,黄色‘金煌’品种,绿色‘桂七’品种)中进行PAO2基因全长cDNA序列的扩增,克隆得到了芒果果皮PAO2基因的全长cDNA序列命名为MiPAO2.结果发现三个着色品种cDNA序列只有几个碱基的差异,以红色‘贵妃’品种为例分析可得全长cDNA序列为1 542 bp,开放阅读框为1 209 bp,编码402个氨基酸,分子重量为43.93 kD,等电点为5.60,定位于过氧化物酶体.通过生物软件预测得到了三种三级蛋白结构图.对NCBI上刊载的30种不同植物构建系统发育树发现该基因编码的蛋白与枳的亲缘关系比其他植物物种的亲缘关系近.为深入探究MiPAO2基因在多胺分解代谢过程中的作用,本研究成功构建出MiPAO2-pTRV2基因沉默载体和MiPAO2-pGreenⅡ62-SK基因过量表达载体,为后续研究MiPAO2基因在芒果果实的抗盐、抗寒以及抗虫过程中的作用机理提供理论依据.
芒果、基因克隆、多胺氧化酶2、基因沉默、过量表达
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Q785;S512.1;Q94
国家自然科学基金;农业部热带作物种质资源保护;引进国际先进农业科学技术计划计划;非营利性科研机构改革启动基金;非营利性科研机构改革启动基金;非营利性科研机构改革启动基金;非营利性科研机构改革启动基金;海南省研究生创新科研项目
2018-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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