创伤弧菌核酸检测试剂国家参考品的建立

摘要：

目的 建立创伤弧菌核酸检测试剂国家参考品并制定质量标准,用于该类试剂的质量评价.方法 收集培养多种创伤弧菌及其他弧菌病原体,经菌落鉴定、16s rRNA测序分析及实时荧光定量PCR试剂检测后筛选出18份样本,稀释、分装后组成创伤弧菌核酸检测试剂国家参考品.邀请不同的实验室对参考品进行协作标定,并对参考品进行均匀性和稳定性考察.结果 建立的国家参考品,包括8份阳性参考品P1～P8、10份阴性参考品N1～N10、1份重复性参考品R和1份检测限参考品L;L使用菌落计数法测定浓度为1×108 CFU/mL.4家实验室参与了国家参考品的协作标定,并根据结果制定质量标准为阳性符合率8/8,阴性符合率10/10,检出限要求至少为1×103 CFU/mL及以上阳性,重复性要求检测10次均为阳性,且Ct值或定量值变异系数不大于5.0%.国家参考品均匀性检测的Ct值变异系数均不高于5%,符合要求;在2～8℃冷藏条件、室温放置7天,均未影响参考品稳定性.结论 成功建立了创伤弧菌核酸检测试剂国家参考品,可用于企业试剂研发的质量控制及评价.

关键词：创伤弧菌、国家参考品、核酸检测、质量评价

所属期刊栏目：16

分类号：R915;R446;TU7

资助基金：国家突发急性传染病诊断试剂参考品及评价技术研究2018ZX10102001-002-002

在线出版日期：2024-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：5-9