期刊专题

10.3969/j.issn.1674-6929.2023.09.014

STAT3调控炎症因子分泌抑制脑梗死细胞凋亡机制研究

引用
目的 初步探讨信号转导和转录活化因子 3(STAT3)在脑梗死细胞凋亡相关机制中的作用.方法 首先,构建小鼠脑梗死(MCAO)和大鼠神经元细胞培养和氧-葡萄糖剥夺(OGD)模型,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白免疫印迹(WB)检测脑组织中STAT3 mRNA和蛋白表达.然后,C57BL/6 小鼠注射AAV9-sh-STAT3 腺相关病毒 3 周后构建抑制STAT3 表达的MCAO模型,采用qPCR检测STAT3 mRNA表达,采用WB检测凋亡相关蛋白Bcl-2 相关X蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)表达,采用Tunle染色检测细胞凋亡情况.接着,小鼠神经元细胞转染Sh-STAT3 和OE-STAT3 慢病毒,构建抑制和过表达STAT3 模型,采用qPCR和WB检测NLRP3 mRNA和蛋白表达.小鼠注射AAV9-sh-STAT3和AAV9-OE-NLRP3腺相关病毒,构建抑制STAT3和过表达NLRP3的MCAO模型,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1 β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)的表达.此外,大鼠神经元细胞转染Sh-STAT3 和OE-NLRP3 慢病毒 48h后构建抑制STAT3 表达和过表达NLRP3 的OGD模型,采用WB检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl2 表达,采用Tunle染色检测细胞凋亡情况.结果 qPCR和WB检测结果显示,STAT3 在MCAO和OGD的脑神经元细胞中表达升高(P<0.05).WB和Tunel染色结果显示,小鼠脑组织敲低STAT3,MCAO导致的细胞凋亡受到抑制(P<0.05).此外,STAT3 通过调控NLRP3 抑制IL-1β、TNF-α、IL-10 和TGF-β表达(P<0.05),过表达NLRP3 可降低STAT3 对MCAO小鼠细胞凋亡的保护效果(P<0.05).结论 STAT3 可通过调控NLRP3 炎症小体介导的炎症因子分泌抑制脑梗死小鼠细胞凋亡.

STAT3、NLRP3炎症小体、炎症因子分泌、脑梗死

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R734.2;R285.5;R587.2

海南省自然科学基金高层次人才项目821RC1121

2023-10-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

1524-1529

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分子诊断与治疗杂志

1674-6929

44-1656/R

15

2023,15(9)

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