颅脑损伤外泌体microRNA差异表达分析

摘要：

目的 通过高通量测序技术检测颅脑损伤(TBI)患者外泌体microRNA(miRNA)的表达变化及探讨其临床意义.方法 收集2020年1月至2022年12月期间东莞市厚街医院急诊科的颅脑损伤患者15例为颅脑损伤组,选择13例同期妇科、五官科和骨科的志愿者为对照组,提取外泌体,用透射电镜鉴定外泌体的形态、纳米流式检测仪分析外泌体粒径及Western blot检测标志蛋白鉴定外泌体.每组选择3例进行miRNA测序,筛选差异表达的基因,对靶基因进行GO分析和KIGG分析.在脑脊液和血清样本中用实时荧光定量PCR方法 进行验证.结果 成功从脑脊液中提取外泌体,透射电镜下观察到呈椭圆形双层膜结构的小囊泡;对照组和TBI组的平均直径分别为73.12 nm和75.38 nm,浓度分别为4.64×109 paritcles/ml和1.49×1011paritcles/mL;Western blot检测出脑脊液中外泌体标记蛋白TGS101和CD9.测序结果 显示共8个差异表达的miRNA,其中2个表达上调,6个表达下调.验证结果 表明颅脑损伤患者脑脊液外泌体miR-29a-3P表达上调2.33倍,差异有统计学意义(t=3.603,P＜0.05),miR-31-5P表达上调2.05倍,差异有统计学意义(t=2.273,P＜0.05),miR-199a-5P表达下调0.32倍,差异无统计学意义(t=0.09,P＞0.05);血清外泌体中miR-29a-3P表达上调1.95倍,差异有统计学意义(t=2.11,P＜0.05),miR-31-5P表达上调2.01倍,差异有统计学意义(t=2.309,P＜0.05),miR-199a-5P表达下调0.34倍,差异有统计学意义(t=2.825,P＜0.05).结论 外泌体中miR-29a-3P和miR-31-5P有潜力作为辅助诊断TBI的生物标志物.

关键词：颅脑外伤、外泌体、microRNA测序

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分类号：R737.33;S852.659.2;Q78

资助基金：基因项目202050715023190

在线出版日期：2023-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1068-1072