10.3969/j.issn.1674-6929.2021.10.040
脂肪间充质干细胞外泌体miR?212?3p对成纤维样滑膜细胞的影响
目的 探讨脂肪间充质干细胞(ADSCs)外泌体miR?212?3p对类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞RA?FLS增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 收集海南医学院第一附属医院类风湿性关节炎(RA)患者和健康者血清各20例,采用RT?qPCR检测血清中miR?212?3p的表达情况.体外细胞可分为4组:RA?FLS细胞单独培养(NC组)、RA?FLS细胞+Exo?ADSCs共培养(Exo组)、RA?FLS细胞+沉默外泌体miR?212?3p共培养(Exo?antagomiR?212?3p组)、敲降RA?FLS细胞SMAD1+沉默外泌体miR?212?3p共培养(si?SMAD1+Exo?antagomiR?212?3p组).外源性调节ADSCs细胞中miR?212?3p和RA?FLS细胞中SMAD1的表达水平后,将ADSCs外泌体与RA?FLS细胞共培养,CCK?8和Transwell分别检测RA?FLS细胞增殖活力、迁移和侵袭能力;采用双荧光素酶报告基因验证miR?212?3p与SMAD1之间的靶向关系.结果 与健康者相比,miR?212?3p在RA患者血清中低表达,差异有统计学意义(P<0.05);与NC组相比,Exo组中miR?212?3p表达显著上调,增殖活力、迁移和侵袭显著降低,差异无统计学意义(均P>0.05);miR?212?3p能够靶向结合SMAD1的3′UTR;同时与NC组相比,Exo组及si?SMAD1+Exo?antagomiR?212?3p组中SMAD1相对表达、RA?FLS细胞增殖活力、迁移和侵袭数显著降低,差异无统计学意义(均P<0.05),而Exo?antagomiR?212?3p组中SMAD1相对表达、RA?FLS细胞增殖活力、迁移和侵袭数与NC组比较,差异无统计学意义(均P>0.05).结论 ADSCs外泌体miR?212?3p在RA患者和RA?FLS细胞中低表达,其通过靶向下调SMAD1抑制RA?FLS细胞增殖、迁移和侵袭.
类风湿性关节炎;滑膜细胞;脂肪间充质干细胞移植;外泌体;miR-212-3p;SMAD1
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白求恩医学科学研究基金资助项目N187CS
2021-11-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1713-1717,1721