杜氏肌营养不良基因突变检测国家参考品的研制

摘要：

目的 建立杜氏肌营养不良基因(DMD)突变检测国家参考品.方法 收集DMD突变患儿及其家系血清,对建系成功的46份细胞系扩增繁殖至所需量后,进行基因组DNA提取并分装,制备成国家参考品.8家实验室采用8种二代测序(NGS)试剂和2种多重连接依赖性探针扩增试剂(MLPA)对候选参考品进行了验证.通过NGS和MLPA试剂检测候选参考品评价参考品的均匀性.通过NGS试剂对反复冻融3次后的候选参考品进行检测以评价稳定性.结果 4家实验室采用MLPA试剂的检测结果一致,8家实验室采用NGS试剂的检测结果基本一致,对于突变位点信息有争议的参考品,采用一代测序进行了测序验证.NGS和MLPA各自均匀性检测结果均一致,反复冻融3次后的检测结果与常规保存的检测结果一致.结论 通过协作验证以及均匀性、稳定性分析,成功建立了DMD突变检测国家参考品,该参考品可用于DMD基因突变检测试剂盒的性能评价.

关键词：杜氏肌营养不良基因;国家参考品;二代测序法;多重连接依赖性探针扩增

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资助基金：国家重点研发计划2018YFC1002400

在线出版日期：2021-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1205-1208