人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品的建立

摘要：

目的 建立人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品.方法 采集HLA?B27阳性和阴性志愿者的新鲜外周血,经EB病毒转化,培养建立永生化细胞系.提取细胞基因组DNA,制备成国家参考品并经高通量测序验证.用4家协作标定单位的HLA?B27核酸检测试剂,采用荧光PCR法、PCR?SSP法、SBT测序法对国家参考品进行定值,并进行国家参考品的复溶(在-20℃和25℃之间反复冻融3次)稳定性和均匀性研究.结果 成功制备HLA?B27国家参考品,包含3例HLA?B27阳性DNA样本和7例HLA?B27阴性DNA样本.经荧光PCR法、PCR?SSP法、SBT测序法协作标定,参考品定值准确.参考品均匀性结果一致,参考品复溶3次后仍然稳定.结论 人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品的各项指标均符合要求,可用于人类白细胞抗原B27核酸检测试剂盒的性能评价.

关键词：人类白细胞抗原、B27、SBT测序法、国家参考品、协作标定

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资助基金：生殖健康及重大出生缺陷防控研究2016YFC1000300

在线出版日期：2020-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1285-1288,1293