乙型肝炎病毒核酸实时荧光PCR超敏检测方法的建立与评价

摘要：

目的 应用Taq?man实时荧光PCR技术,建立一种超敏检测乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)载量的方法(以下简称超敏试剂),并对其临床应用进行评价.方法 对比GeneBank中HBV DNA基因组序列,使用Primer 5.0软件在其S区和C区分别设计一对特异性的引物和探针,应用Taq?man探针技术,优化反应体系和反应条件.并收集195例临床样本与某国产试剂进行平行检测,采用相关性分析和Bland?Altman等方法对检测结果进行分析.结果 建立的HBV DNA超敏检测方法灵敏度达10 IU/mL,线性范围20～1×109 IU/mL,准确性为100％,覆盖型别为A、B、C、D、E、F、H,批内和批间变异系数在5％以内.195例临床样本检测结果显示,与某国产试剂相比,超敏试剂的阳性符合率为99.45％,阴性符合率为91.67％,总符合率为98.97％(Kappa值为0.9112,P<0.05).超敏试剂与某国产试剂具有很强的相关性(r=0.9791,P<0.0001).结论 本研究成功建立了一种HBV DNA实时荧光PCR检测方法,具有很高的临床应用价值.

关键词：HBVDNA、Taq?man、实时荧光PCR、相关性

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资助基金：国家科技重大专项2018ZX10732401;国家科技重大专项2018ZX10306414

在线出版日期：2019-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：348-354,378